蛍光フィルターとは何ですか?

エミッションフィルター

発光フィルターは、サンプルからの望ましい蛍光が検出器に到達できるようにするという目的を果たします。短い波長は遮断し、長い波長では高い透過率を示します。フィルタのタイプには番号も関連付けられています。たとえば、図の BA510IF (干渉バリア フィルタ) は、最大透過率の 50% の波長を指します。

励起フィルターに対する同じ推奨事項 (最小透過率、帯域幅、OD、および CWL) が放射フィルターにも当てはまります。理想的な CWL、最小透過率、および OD の組み合わせを備えた発光フィルターは、可能な限り深いブロッキングで可能な限り明るい画像を提供し、最も微弱な発光信号の検出を保証します。

ダイクロイックミラー

ダイクロイックミラーは励起フィルターと発光フィルターの間に45°の角度で配置され、励起信号を蛍光色素分子に向かって反射し、発光信号を検出器に送信します。理想的なダイクロイック フィルターとビーム スプリッターは、励起フィルターの帯域幅で 95% を超える反射と、発光フィルターの帯域幅で 90% を超える透過を備え、最大反射と最大透過の間で急激な変化を示します。迷光を最小限に抑え、蛍光画像の S/N 比を最大化するために、蛍光色素の交差波長 (λ) を考慮してフィルターを選択します。

この図のダイクロイック ミラーは DM505 です。505 ナノメートルがこのミラーの最大透過率の 50% の波長であるため、この名前が付けられています。このミラーの透過率曲線は、505 nm を超えると高い透過率を示し、505 ナノメートルの左側で透過率が急激に低下し、505 ナノメートルの左側で最大反射率を示しますが、505 nm 未満では依然として透過率がいくらかある可能性があります。

ロングパスフィルターとバンドパスフィルターの違いは何ですか?

蛍光フィルターは、ロングパス (LP) とバンドパス (BP) の 2 つのタイプに分類できます。

ロングパスフィルターは長い波長を透過し、短い波長を遮断します。カットオン波長はピーク透過率の 50% の値であり、カットオンを超える波長はすべてロングパス フィルターによって透過されます。これらはダイクロイックミラーや発光フィルターによく利用されます。ロングパスフィルターは、アプリケーションで最大限の発光収集が必要な場合、およびスペクトル識別が望ましくない、または必要でない場合に使用する必要があります。これは一般に、バックグラウンドの自家蛍光レベルが比較的低い標本内に単一の発光種を生成するプローブの場合に当てはまります。

バンドパスフィルターは特定の波長帯域のみを透過し、その他の波長帯域を遮断します。これらは、蛍光団発光スペクトルの最も強い部分のみを透過させることによってクロストークを低減し、自家蛍光ノイズを低減し、その結果、ロングパスフィルターでは提供できない、高バックグラウンドの自家蛍光サンプルにおける信号対雑音比を改善します。

BestScopeでは何種類の蛍光フィルターセットを提供できますか?

一般的なタイプのフィルターには、青、緑、紫外線フィルターなどがあります。表に示すとおりです。