蛍光顕微鏡は、高強度の光源を使用して標本を照明し、サンプル内の蛍光色素を励起する光学顕微鏡の一種です。標本への照明は通常、紫外線を発する光源を使用して行われます。生物学、医療、工業分野で広く使用されています。
蛍光顕微鏡はどのように機能するのですか?
蛍光顕微鏡は、水銀ランプまたはキセノンランプを使用して紫外線を生成します。光は顕微鏡に入り、ダイクロイックミラー(ある波長範囲を反射し、別の波長範囲を通過させるミラー)に当たります。ダイクロイックミラーは紫外光を標本まで反射します。標本によっては、クロロフィルなどの蛍光物質が含まれているため、紫外線下で自然に蛍光を発するものもあります。観察する標本が自然に蛍光を発しない場合は、蛍光色素と呼ばれる蛍光色素で染色できます。
蛍光顕微鏡は何で構成されていますか?
1. 光源
最も一般的な光源は、水銀、キセノン、LED です。水銀は蛍光顕微鏡に最高品質の光を提供します。 LED は他の光源よりも安価で、消費電力も少ないため、人気が高まっています。
| 水銀ランプ | キセノンランプ | 導かれた | |
| 放射される光の波長 | 350~370nm | 400nm~450nm | 400~700nm |
| 寿命(時間) | 200-300 | 400-600 | 10000 |
| アドバンテージ | 1. 高強度の光、最も一般的な光源。 2. 強力な紫外線と青紫を放射し、あらゆる種類の蛍光色素を励起します。 3. 明るくカラフルな画像。 | 1. スペクトル強度が安定しています。 2. 赤外および中赤外のスペクトル強度が強い。 | 1.交換が簡単です。 2.ウォーミングアップの必要はありません。 3. 瞬時にオン/オフを切り替えることができます。 4. 光源の強度を制御します。 |
| 短所 | 1. 寿命が短い。 2. ウォームアップ時間が長い。 | 1. 過剰な熱のために特別な低電圧 DC 電源ボックスが必要です。 2. 水銀ランプより高価 | 1. 紫外線は水銀灯より弱いです。 2.光の波長ごとに、放射する帯域幅が狭いため、個別の LED が必要です。 |
水銀蛍光アタッチメント
LED蛍光灯アタッチメント
2. 励起フィルター
励起フィルターは蛍光顕微鏡の操作に不可欠です。蛍光色素が吸収する可能性のある、より短い波長の光を透過します。また、他の励起光源も遮断します。
励起フィルター(B,G,U,V)
3. ダイクロイックミラー
ダイクロイック ミラーは、特定の波長の光を反射し、他の波長の光を透過する光学フィルターの一種です。蛍光顕微鏡で励起波長と発光波長を分離するために使用されます。
4. エミッションフィルター
発光フィルターは、蛍光色素分子によって放出される波長のみを通過させ、この帯域外のすべての不要な光、特に励起波長をブロックします。
5. 蛍光染料
蛍光染料は蛍光特性を持つ有機化合物であり、高照度の紫外光によって励起された後、コントラストの高い緑色の可視光を放射することで蛍光画像を形成できます。一般的に使用される蛍光色素は次のとおりです。 DAPI (49,6-ジアミジノ-2-フェニルインドール)、アクリジン オレンジ、オーラミン ローダミン、Alexa Fluors、または DyLight 488。
蛍光顕微鏡は何種類ありますか?
1. 正立落射蛍光顕微鏡:
最も一般的なタイプの蛍光顕微鏡です。蛍光色素の励起と蛍光の検出は、同じ光路を通じて (つまり、対物レンズを通じて) 行われます。蛍光顕微鏡、特にライフサイエンスで使用される蛍光顕微鏡の大部分は落射蛍光設計です。
BS-2081F 研究用蛍光生物顕微鏡
2. 共焦点蛍光顕微鏡:
共焦点蛍光顕微鏡: このタイプの蛍光顕微鏡は、レーザー走査と蛍光照明を組み合わせて画像を生成します。細胞や組織の研究、細胞内のタンパク質やその他の物質の検出、物質の厚さの測定など、幅広い用途に使用できます。
BS-2081F 研究用蛍光生物顕微鏡
3. 倒立蛍光顕微鏡
この種の顕微鏡の光源とコンデンサーは上部に下を向いて配置されています。照明の角度は、検査する試料の表面に対して 90 度である必要があります。
BS-2095F 倒立型蛍光顕微鏡
蛍光顕微鏡の長所と短所は何ですか?
利点:
・生体内の細胞を傷つけることなく観察できる
- 正確な色の高解像度画像を提供します
- 細胞内の生きたプロセスの研究が可能
- タンパク質や核酸など、細胞内のさまざまな種類の分子を識別するために使用されます。
短所:
-蛍光色素でタグ付けされた細胞内の特定の構造のみを観察できます。
- 蛍光の過程における電子励起による光退色は、蛍光色素の反応性分子に影響を与える可能性があります。その結果、反応性染料は蛍光発光強度という化学的特性を失う可能性があります。
-蛍光色素で染色した後、蛍光色素分子が短波長光からの高エネルギー光子を吸収するため、細胞は光毒性の影響を受けやすくなります。
蛍光顕微鏡の用途は何ですか?
蛍光顕微鏡は、生化学、細胞生物学、微生物学、免疫学、医学などのさまざまな研究および応用分野で広く使用されています。
1. 生物学の分野では、蛍光顕微鏡を使用すると、蛍光色素標識の助けを借りて、細胞および超顕微鏡レベルの細胞成分と活動を正確かつ詳細に識別できます。
2. 医療分野では、蛍光顕微鏡は蛍光試薬を使用して細菌やウイルスの存在と分布を検出したり、手術を容易にするために手術標的の標識を支援したりできます。
3. 鉱物学の分野では、アスファルト、石油、石炭、酸化グラフェン、その他の鉱物など、自発蛍光特性を持つ物質を研究するために蛍光顕微鏡がよく使用されます。
4. 材料科学では、蛍光顕微鏡は繊維産業や製紙産業で繊維ベースの材料を分析するために使用できます。
投稿日時: 2023 年 3 月 14 日